Estudios de Microscopía Confocal en Células, Explantes de Piel y Nanopartículas

El objetivo es la obtención de imágenes fluorescentes de alta resolución que permitan obtener información sobre los mecanismos de acción o de absorción de principios activos, formulaciones cosméticas o nanofármacos.

Esta técnica permite la obtención de imágenes de fluorescencia tanto de células como tejidos y de principios activos o nanofármacos si éstos están marcados fluorescentemente. Dentro de los diferentes estudios que pueden realizarse están los siguientes:

• CLSM o Microscopía de laser confocal de barrido: esta variante permite obtener imágenes de cortes longitudinales de piel o explantes a diferentes planos focales que posteriormente pueden ser rotados y superpuestos, generando así una imagen 2D (o 3D) de lo equivalente a un corte transversal de las capas de la piel, desde el estrato corneo, la epidermis y la región inicial de la dermis). De esta manera pueden observarse procesos como la penetración de principios activos y el efecto de estos sobre las células o regiones de la piel y la composición de la flora dérmica. Dependiendo del objetivo utilizado, se pueden llegar a observar espesores desde 10-15 µm con alta resolución hasta 60-70 µm con una resolución más baja.
• Time lapse o secuencia temporal: Con esta técnica se pueden obtener imágenes secuenciales del efecto de un principio activo sobre las células con el paso del tiempo. Si el principio activo o nanofármaco es fluorescente puede también observarse el mecanismo de entrada en la célula y en que orgánulos se aloja, incluso como es excretado. Esto permite incluso la elaboración de archivos de video.
• Estudios de co-localización: Con este tipo de análisis pueden aportarse datos numéricos relativos e imágenes sobre la distribución espacial de compuestos fluorescentes en el entorno de la célula o distribución espacial del efecto sobre las células o en un área de tejido.

Este tipo de estudios que generan imágenes permiten extraer datos con un alto valor comercial para las empresas ya que, aunque los datos cuantificables que pueden aportar son relativos, la visualización del efecto generado dota de un valor que no puede ser igualado por los datos numéricos, sobre todo cuando el cliente final no posee un perfil técnico. También es posible obtener algunos datos numéricos relacionados con la geometría de la muestra, etc. El uso de microscopía como técnica analítica permite obtener una idea directa de lo que ocurre en los tejidos o células en contraposición de las medidas bioquímicas indirectas que normalmente requieren de una interpretación de los resultados mucho más compleja y de personal más específico. Los estudios de CLSM para la industria cosmética tienen cada vez más relevancia así como el estudio de los mecanismos de acción de fármacos y nanofármacos para las agencias reguladoras (EMA y FDA).

Poseemos un equipamiento de última generación para llevar a cabo estos estudios y tenemos la experiencia de trabajar con explantes de piel y otros tejidos e incluso con nanoformulaciones fluorescentes. Otra de las grandes ventajas es que son estudios bastante rápidos y que evitan el uso de otro equipamiento mucho más complejo y tedioso (micrótomo para la generación de los cortes transversales, por ejemplo).